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金黃色葡萄球菌高通量快速檢測技術
2017年08月31日  

技術概述:高通量快速檢測技術是指一次可快速檢測多個樣品或對同一樣品進行多種檢測的技術。微生物的常規檢測方法是培養法,基本過程是首先培養和分離微生物,然後再進行生化鑒定,有時還需要進行血清學鑒別,整個過程通常需要3~7天時間,甚至更長的時間,其檢驗結果准確可靠,但費時費力。金黃色葡萄球菌紙片法將傳統方法中需要多次實驗才能完成的任務一次完成,並在15小時~24小時內獲得結果,從而大大節約樣品分析時間。

增産增效情況:農産品、食品快速檢測技術,作爲其質量安全監管的重要手段,對及時開展監測、了解我區酥油、糌粑、糕點、生熟食品等微生物汙染狀況具有重要意義。通過監管手段的更新,爲監督和保障食品衛生提供技術支撐,有效促進食源性疾病的及時發現和防控,將産生巨大社會經濟效益。

技術要點:

1、操作方法

(1)樣品處理:取樣品25毫升(克)放入含有225毫升滅菌磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,調節樣品勻液pH至6.0~8.0。用1毫升滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1毫升,注入含有9毫升稀釋液的試管內,振搖後成爲1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。

(2)接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將金黃色葡萄球菌測試片(BT206)置于平坦實驗台面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1毫升樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然後再將上層膜緩慢蓋下,靜置10秒左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。

(3)培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15 小时~24小时。

2、結果判讀:培養後,測試片上紫紅色的菌落爲金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落爲其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更爲可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重複檢驗一次。

3、計數原則及報告方式

(1)選擇菌落數在20~200個之間的紙片進行計數。

(2)若兩個稀釋度的菌落數均在20~200之間,則取其平均菌落數乘以稀釋倍數,即爲每毫升(或每克)樣品中金黃色葡萄球菌數。

(3)如果所有稀釋度的測試片上的菌落數都小于20,則計數稀釋度最低的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之;如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數報告之。

(4)如果所有稀釋度的菌落數都大于200,計數最高稀釋度的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。計數菌落數大于200的測試片時,也可計數一個或兩個具有代表性的方格內的菌落數,換算成單個方格內的菌落數後乘以20(濾紙區面積爲20平方厘米),即爲測試片上估算的菌落數。報告單位以CFU/毫升(或CFU/克)表示。

適宜區域:適宜全區各地。

技術依托單位:七天棋牌質量標准與檢測研究所

通訊地址:西藏拉薩市金株西路149號區農科院質標所(綜合實驗樓)

郵政編碼:850032

联系人:李颖 达瓦卓玛

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